谷物中淀粉的测定?
(含多量淀粉样品的测定：HCl水解一铜还原直接滴定法)?原理：淀粉在稀酸(1%HCl)的作用下，水解为糊精和麦芽糖，最后都转化成葡萄糖：?(C6H10O5)n+nH2O→n(C6H12O6)?淀粉 葡萄糖?然后用测定还原糖法测定葡萄糖，再乘上换算系数0?9即为淀粉含量。根据反应式淀粉与葡萄糖之比为：?162.1：180.12=0.9：1即为0.9克淀粉水解后可得1克葡萄糖。?此法优点是分析步骤简单，沸水浴中水解时间约3—4小时完成，所以采用较普遍。但其缺点是在酸水解淀粉的同时，谷物中的半纤维素和多缩戊糖也随之水解，这使测定结果产生正误差。?主要仪器：恒温水浴锅、电热烘箱?试剂：(1)1%HCl:23ml浓HCl(二级)加水至1L。?(2)10%NaOH?(3)10%中性醋酸铅：称取100gPb(OAC)2溶于1L水中，过滤。(4)甲基红指示剂?(5)I2—KI溶液：称取2gKI溶于5ml水中，加入1gI2加水至1L保存于棕色瓶中。其余同4—4.1.1。?操作步骤：称取风干磨细通过60目筛的样品，1.××××—2.××××g(如系含脂肪高的样品须先脱脂)，放入250ml三角瓶中，加入1%HCl150ml，用具有长玻璃管的塞子塞紧(注1)，在沸水浴中加热(也可放入105℃烘箱中代替)，加热过程中须常常摇动，并注意三角瓶的液面浸入沸水中，同时切勿使三角瓶直接接触水浴锅底，以免跳动或样品焦化。经3—4小时后，取出试样少许，检查是否水解完毕。具体作法如下：用玻璃棒或皮头吸管吸少许带固体颗粒的悬液，放在白瓷板上，加1滴I2—KI溶液，如固体不显蓝色、红色或紫色说明水解已完毕。所取溶液须无损地倒回三角瓶中，并用少量水冲洗，洗液全部收集在三角瓶中(也可于玻片上在低倍显微镜下观察颜色)。如水解不完全，应继续加热半小时后再进行检查，直到水解完全为止。?水解结束后，冷至室温，加入甲基红3—4滴，用10%NaOH中和至微黄色为度(注2)。然后逐滴加入10%中性Pb(OAC)2约5—10ml，以沉淀蛋白质。静置片刻，待上部溶液澄清后，再加入几滴Pb(OAC)2溶液，检查蛋白质是否沉淀完全。继续滴加Pb(OAC)2溶液直至无白色絮状沉淀产生为止(注3)。?将水解液过滤入250ml容量瓶中，用水洗涤三角瓶和沉淀数次，滤液全部收集于容量瓶中，加水定容。?用吸管吸取50ml清液于100ml容量瓶中，逐滴加入5—7ml饱和Na2SO4溶液以除去过量的醋酸铅(注4)，至不再产生白色PbSO4沉淀为止，加水定容后过滤。此即由淀粉水解而得到的葡萄糖溶液。?然后将此淀粉水解完毕的葡萄糖待测液装入50ml滴定管中，按4—4.1.1操作步骤测定还原糖的含量。?结果计算：?淀粉，%=测得葡萄糖(mg)×分取倍数/样品重(mg)×0.9×100式中0.9—淀粉单元的式量为162.1，葡萄糖的分子量为180.1，两者之比为0.9，分取倍数一此操作中为250/50×100=500注释?［注1］在沸水浴上加热时用具有长约50—60mm玻管的塞子塞三角瓶，为使溶液浓度在加热程中不致改变，加热蒸发的水，可由空气冷凝后滴回瓶中。?［注2］此处注意勿加入过量的碱，因单糖在碱性溶液中易分解。且在加入Pb(OAC)2沉淀蛋白质时会形成糖的铅盐沉淀。［注3］注意在近中性溶液中，也可能产生氢氧化铅的白色沉淀，必须与微带黄色或白色的絮状、较轻，悬浮在溶液中的蛋白质沉淀区分开。Pb(OAC)2沉淀较细、较重，能迅速地沉淀下来。?［注4 ］过量的Pb(OAC)2对下步测定有碍，必须除去。但如不立即测定还原糖，则可暂不除去铅，因为铅离子可以防腐。
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