开氏法测定粗蛋白质
适用范围 本法适于谷物及油料作物种子中粗蛋白质测定，是农牧渔业部部颁标准法，即用开氏法测总氮量，再乘以蛋白质换算因数，而得粗蛋白质含量。?试剂配制?(1) 1/20.2mol/L硫酸标准液(此浓度适用于谷类作物种子)或1/2 0.05mol/L硫酸标准液(此浓度适用于大豆种子)。?(2)浓硫酸?(3)混合催化剂：称取硫酸钾(或硫酸钠)100g，硫酸铜10g，均匀混合后研细(通过0?177mm孔径)，贮于瓶中。(4)蔗糖(分析纯)?测定步骤将选有代表性种子，按四分法取样后，置60℃烘箱中干燥，用粉碎机磨碎，通过0.05mm孔径，置磨口广口瓶中保存。?称样0.5000—0.1000g，放入100ml开氏瓶中，放入2—4g混合催化剂和5—8ml浓硫酸，混匀放置过夜。将开氏瓶倾斜置于电炉上，开始用小火加热，待泡沫停止后加大火力，保持开氏瓶中液体连续沸腾，沸腾的酸应在开氏瓶颈中部冷凝回流，待消煮液无微小碳粒并呈透明的浅绿色时，继续消煮30min(含蛋白质高的样品，如豆类，需煮60min)。待消煮液稍冷却后，无损地移入100ml容量瓶中，多次用水洗涤，冷却后定容。放置澄清。用移液管吸取待测液5.00或10.00ml(含NH4+—N约1mg)，放入半微量定氮蒸馏装置中，加入约5ml40%的氢氧化钠进行蒸馏。按同样条件，称0.1g蔗糖代替样品做空白试验。结果计算粗蛋白质%=×0.014×分取倍数〖〗W(1-水分率)〖SX〗×K×100?式中：V—滴定样品时所用标准酸的毫升数；V0—空白测定所用酸的毫升数；M—标准酸的摩尔浓度；0．014—氮的毫摩尔质量g/mmol；取用量倍数—本操作步骤中为100/5或100/10，即为20或10；W—称样重(g)；K—蛋白质的换算因数。一般情况下为6.25，这是由蛋白质平均含氮量为16%计算而得，即100/16=6.25。但由于各种作物蛋白质中含氮量不同，其换算因数也各不相同。各类作物蛋白质换算因数，可见表各类作物的蛋白质换算因数作物（种子）蛋白质换算因数
麦类、杂豆类水稻高粱玉米、大豆及其他谷类作物5.705.955.836.25
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